關于基因組RNA純化試劑盒，你應該知道的事

更新時間：2021-06-25

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　　基因組RNA純化試劑盒用于各種植物、動物和微生物的RNA提取。每個工具箱都有說明書。實驗者只需遵循說明書中的步驟。它非常方便，適用于RNA的快速提取。提取的RNA完整性好，純度高，可用于分子生物學后實驗。

　　該試劑盒可用于從同一細胞或組織樣品中同時純化基因組DNA和總RNA。由于不需要將樣品分成兩部分進行不同的純化步驟，該試劑盒可以在很大程度上回收DNA和RNA。純化后的DNA和RNA分別洗脫，可立即用于各種下游實驗。該試劑盒不含苯酚、氯仿等有毒物質(zhì)，不需要乙醇沉淀。操作簡單快捷。

　　基因組RNA純化試劑盒的操作步驟是什么呢？

　　1. 樣品處理

　　a、植物組織：在-70℃下取新鮮或冷凍組織100毫克℃然后在液氮中研磨，然后將粉末加入1ml裂解液中攪拌均勻。

　　b、動物組織：100毫克新鮮或冷凍-70℃加入1ml裂解液，用組織研磨杵或均質(zhì)器均質(zhì)。

　　c、貼壁細胞：直接將裂解液加入培養(yǎng)板中裂解細胞，每106個細胞加入1ml裂解液。用取樣器吹勻。

　　d、細胞懸液：離心收集細胞。向106個動物、植物和酵母細胞或107個細菌細胞中加入1mL裂解液，混勻。

　　e、血液處理：取新鮮血液0.2-1ml，紅細胞裂解液3倍體積，混勻，室溫放置10分鐘，10000rpm離心1分鐘。棄去上清液，如果沉淀中含有紅細胞，加入2倍體積的紅細胞裂解液重復裂解步驟。離心后，沉淀并添加1ml裂解液混合。

　　2、將處理后的樣品在室溫下放置5分鐘，使核酸-蛋白質(zhì)復合物*分離。

　　3、向勻漿樣品中加入0.2ml三錄甲烷，蓋上試管，劇烈振動15秒，室溫放置3-5分鐘。

　　4、2-8℃離心℃12000rpm，持續(xù)10分鐘。RNA主要在上層無色水相中，將水相轉(zhuǎn)移到新管中，不吸收沉淀。

　　5、吸附柱預處理：向吸附柱中加入500ul洗柱液，室溫放置2分鐘，離心轉(zhuǎn)速2-812000rpm℃放置2分鐘，并丟棄廢液。

　　6、向第4步收集的上清液中加入200ul無水乙醇，混勻，加入吸附柱中，靜置2分鐘，2-8轉(zhuǎn)/分離心℃放置2分鐘，并丟棄廢液。

　　7、向吸附柱中加入600ul的漂洗液（使用前請檢查是否加入無水乙醇），離心轉(zhuǎn)速2-812000rpm℃放置2min，并丟棄廢液。

　　8、向吸附柱中加入600ul沖洗液，以2-812000rpm離心℃放置2min，并丟棄廢液。

　　9、以12000rpm離心2min，丟棄收集管，將吸附柱置于室溫下幾分鐘，從吸附柱中除去殘留的沖洗液。

　　10、將吸附柱放入新管中，將50-100ul無核糖核酸酶ddH2O滴入膜中芯，室溫放置5min，12000rpm離心2min

　　即得到RNA。

　　好了，以上便是關于基因組RNA純化試劑盒的相關內(nèi)容介紹了。